1、快速微量提取法1.取1.5ml菌體培養物于一滅菌Ep管中,12000rpm離心1min,丟去上清夜,收集菌體。2.加入400μl裂解液(40mMTris-醋酸,20mM醋酸鈉,1mMEDT閱讀全文
1.0.2-0.5g糞便置于Ep管中(冰水浴),加入1mlPBS,漩渦振蕩混勻,200xg離心5min,取上清,冰水浴;2.向沉淀中加入1mlPBS,重復步驟1;3.混合兩次上清,用300g離心5min,閱讀全文
1. 挑取大腸桿菌菌單菌落,培養至穩定期,取菌液 2.0 mL 于2.0 mL離心管離心得菌體。2. 每管加入 1 mL Trizol 溶液,蓋緊管蓋,激烈振蕩15 s,室溫靜置5 min 4℃,12000 g,離心 10 min;取上清轉閱讀全文
一、水煮模板法——主要用于PCR反應1、 接種單菌落于LB或平板中,連續劃線,37℃培養18-24小時。2、 刮取1~2接種環菌苔加入150ul三蒸水中,混勻,100℃煮沸10min。3、 12000轉/閱讀全文
一、基因組DNA提取方法1、貼壁細胞用胰酶消化,離心收集。2、細胞重懸于冰冷的PBS漂洗一次,離心收集。試驗步驟2再重新作一邊。3、加入5mlDNA提取緩沖液,(10mmol/LTris-cl,0.1mol/LEDTA,0.5%SDS),混閱讀全文
1.紅細胞裂解液的稀釋:根據處理血液樣品的體積選取適當體積的10×紅細胞裂解液(例如待處理的血液樣品體積為200μl,則取140μl10×紅細胞裂解液),用RNase-freedd閱讀全文
1、取出細胞、收集上清保存備用2、用冷PBS沖洗細胞兩次3、加入 1ml Trizol (24孔板每孔加0.5ml即可),調小刻度用移液器吹打細胞至液體澄清(生化:搖動混勻后室溫孵育10min)4、將裂解閱讀全文
1、 取新鮮動物組織0.1-0.2g置于組織勻漿器中,加入預冷的細胞裂解液1買來,在水浴中迅速勻漿15-30s,以充分研碎組織。然后將細胞懸浮液吸入另一試管中。2、 加入2mol醋酸鈉(ph4.0)120μl,充分混閱讀全文
需要準備的試劑氯仿、異丙醇、75%乙醇(用RNase-free水配制)、RNase-free的水1.勻漿處理(Homogenization)直接閱讀全文
方法一:血凝塊于室溫下自然解凍后,取約1.0cm3的血凝塊樣本,加入適量生理鹽水,浸泡15min,6000r/min離心5min,棄上清。沉淀機械磨碎(勿過度),加入適量提取液(10mmol/LTris2HCL,100mmol/LNaCl,閱讀全文