可能的原因：1）Buffer W2中未加入無(wú)水乙醇，應(yīng)按比例補(bǔ)加無(wú)水乙醇。如果是錯(cuò)誤地加入了其他試劑，請(qǐng)向我公司技術(shù)部尋求幫助。2）Buffer W2中錯(cuò)誤地加入了70%乙醇。請(qǐng)向我公司技術(shù)部尋求幫助。3）細(xì)菌培養(yǎng)物中污染有真菌或其他雜菌（！注意：只針對(duì)原核生物起作用的抗生素對(duì)真菌無(wú)效）。確保從新鮮制備的含抗生素的平板中挑取單克隆菌落接種培養(yǎng)。4）質(zhì)...... 查看回答 ​

1）細(xì)菌沉積在管底，難以用旋渦振蕩充分懸浮。如果要收集超過(guò)5ml細(xì)菌培養(yǎng)物，卻仍然使用快速收集菌體（12000 rpm 離心30秒）的方法，可能會(huì)導(dǎo)致收集的菌體難以懸浮，此時(shí)可嘗試用移液器吸頭吹打菌體沉淀的方法懸浮細(xì)菌；或者改為3000 rpm離心5分鐘收集菌體。2）加入Buffer II后，溶液變得非常粘稠，無(wú)法流動(dòng)。通常造成上述原因是細(xì)菌用量過(guò)多所至，請(qǐng)適當(dāng)減少細(xì)菌用量...... 查看回答 ​

1）限制性酶切后電泳質(zhì)粒消失，沒(méi)有條帶，或者電泳條帶出現(xiàn)嚴(yán)重的拖尾現(xiàn)象。可能是選用了野生型的或者是end A⁺的宿主菌所致，并且未用Buffer W1洗滌純化柱。請(qǐng)確保用Buffer W1洗滌純化柱，或者按附錄中的方法對(duì)質(zhì)粒DNA作進(jìn)一步的純化。 2）酶切不能完全切開(kāi)。本試劑盒純化得到的質(zhì)粒DNA不存在酶切抑制物，可直接用于酶切（比如20 μl酶切體系...... 查看回答 ​

1)正常的質(zhì)粒DNA帶型，見(jiàn)圖1:C泳道：空載體pUC19電泳效果。頂部條帶1：二聚體質(zhì)粒DNA；中間條帶2：含切口的質(zhì)粒DNA；下部條帶3：超螺旋質(zhì)粒DNA。A泳道：空載體pUC19單酶切效果。B泳道：含插入片段的pUC19雙酶切效果。2)異常的質(zhì)粒DNA帶型，見(jiàn)圖2：獲得的質(zhì)粒DNA二聚體含量很高，或者純化的質(zhì)粒DNA于﹣20℃儲(chǔ)存一段時(shí)間后二聚體增多（見(jiàn)圖2泳道1）。...... 查看回答 ​

可能的原因：1)Buffer I中所含的RNase A活性降低。如果加入RNase A的Buffer I在2~8℃保存的時(shí)間超過(guò)6個(gè)月的，應(yīng)再補(bǔ)充RNase A至終濃度100 μg/ml。2)菌液量過(guò)多或者細(xì)菌本身特性導(dǎo)致RNA含量過(guò)多，不能完全被RNase A降解。可以增加Buffer I中RNase A的濃度。3)冬季環(huán)境溫度低，會(huì)導(dǎo)致RNase A活性降低...... 查看回答 ​

可能的原因：1）溶解步驟操作太劇烈：加入Buffer II后應(yīng)溫和地翻轉(zhuǎn)離心管使細(xì)菌溶解。2）溶解步驟停留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)：加入Buffer II后靜置時(shí)間不應(yīng)超過(guò)5分鐘。3）中和步驟操作太劇烈：加入Buffer N8(III)后應(yīng)溫和地翻轉(zhuǎn)離心管使溶液中和。4）細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間超過(guò)16小時(shí)，導(dǎo)致部分細(xì)菌出現(xiàn)了溶菌現(xiàn)象。5）細(xì)菌不是新鮮收集的或者收...... 查看回答 ​