科研用戶最大的煩惱就是，和你取同一個(gè)樣本、做同樣研究工作的人太少了，導(dǎo)致在選擇試劑盒的時(shí)候找不到客觀、有價(jià)值的評(píng)測(cè)報(bào)告，于是最后同學(xué)們只能沿用師兄、師姐實(shí)驗(yàn)時(shí)采購(gòu)的試劑盒。然而沒有對(duì)比，就沒有傷害——一些品牌知名度較高的，使用效果卻不怎么樣的產(chǎn)品就這么一直默默地幸存下來了。今天我們就來實(shí)測(cè)比較一下SIMGEN和國(guó)內(nèi)知名大牌T**NGEN的高多糖多酚植物總RNA試劑盒之間的差異，選用的樣本是典型的提取RNA困難的樣本——馬鈴薯塊莖。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>

對(duì)比SIMGEN和T**NGEN兩個(gè)品牌的高多糖多酚植物總RNA試劑盒的性能差異。

實(shí)驗(yàn)材料：

馬鈴薯塊莖、一次性手術(shù)刀、研缽

高多糖多酚植物總RNA試劑盒（SIMGEN Cat.No.5103050）、T**NGEN RNAprep PureRNAprep Pure多糖多酚植物總RNA提取試劑盒（DP441）

超微量電子天平（DENVER INSTRUMENT，TP-213）

旋渦震蕩器（越新儀器，XH-C）

超微量分光光度計(jì)（SIMGEN Cat.No.sim100）

電泳儀（北京六一儀器廠，DYY-6C型 ）

實(shí)驗(yàn)方法：

由于馬鈴薯塊莖非常容易研碎，本次實(shí)驗(yàn)采用裂解液浸泡樣本研磨法破碎樣本后提取RNA，具體操作步驟如下：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

1、在超微量分光光度計(jì)上分別用各自試劑盒的RNase-Free Water/ RNase-Free ddH₂O調(diào)零，測(cè)量洗脫下來的RNA，結(jié)果如下：

1、2為SIMGEN高多糖多酚植物總RNA試劑盒的提取結(jié)果，3、4為T**NGEN RNAprep Pure多糖多酚植物總RNA提取試劑盒的提取結(jié)果。

2、在1%的瓊脂糖凝膠上，加入5 μl洗脫的RNA進(jìn)行電泳，結(jié)果如下：

分析與討論：

1. 實(shí)驗(yàn)最初T**NGEN的RNAprep Pure多糖多酚植物總RNA提取試劑盒使用的裂解液是試劑盒中配備的裂解液SL，但是在研磨階段裂解液SL與馬鈴薯塊莖組織形成膠狀物沉淀，實(shí)驗(yàn)根本無法繼續(xù)進(jìn)行下去，與該品牌官網(wǎng)宣傳的“配有超強(qiáng)裂解能力的裂解液SL，僅需1小時(shí)即可從香蕉、西瓜、蘋果、梨等果肉，紅薯、馬鈴薯等塊莖，棉花……” 內(nèi)容嚴(yán)重不符。最后只好按照其說明書上的描述所說向T**NGEN公司索取了另一種裂解液HL來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

2. 盡管更換了裂解液HL，但是從測(cè)得的濃度以及電泳條帶的亮度分析，T**NGEN的這款多糖多酚植物總RNA提取試劑盒只提取到了微量的RNA，差不多只有0.5 μg，提取效果與其網(wǎng)站上宣傳的效果仍然不符，頗有“學(xué)術(shù)造假”之嫌疑。而SIMGEN的高多糖多酚植物總RNA試劑盒則提取到了5.9 μg、12.9 μg的RNA，是T**NGEN試劑盒的10倍以上，而且條帶完整清晰，非常明亮，與分光光度計(jì)測(cè)得的濃度有很好的對(duì)應(yīng)關(guān)系。

3. 馬鈴薯塊莖中含有大量淀粉，切開后容易變褐色，是典型的高多糖多酚植物代表，因此我們有理由相信T**NGEN的RNAprep Pure多糖多酚植物總RNA提取試劑盒并不像其自己宣傳的那樣“專門針對(duì)多糖多酚等難提植物樣本獨(dú)特配置”，至少馬鈴薯塊莖樣本的提取效果就很不理想。而SIMGEN的高多糖多酚植物總RNA試劑盒提取馬鈴薯塊莖RNA則輕松過關(guān)。