載體構建是分子生物學研究常用的手段之一。主要包括已有載體多克隆位點MCS的改造和已有載體啟動子、增強子、篩選標記等功能元件的改造。載體構建完成后可利用PCR原理進行測序驗證。 但由于影響因素較多,對研究者經驗要求較高,因而往往費時費力。
本公司憑借長期分子生物學工作的豐富經驗,集中人力,為您提供更高效、快捷的載體構建服務。根據已有的載體進行改造方案的設計,完成現有載體不同功能元件的改造;可應客戶要求將指定片段亞克隆至各載體。
(2)目的DNA片段和載體鏈接
(3)鏈接產物的轉化
(4)克隆篩選。
1、服務范圍
(1)載體改造包括載體MCS改造;啟動子、增強子、篩選標志物等功能元件的改造;
(2)以PCR為基礎的各類載體構建,包括細菌表達載體、酵母表達載體、桿狀病毒表達載體、哺乳動物表達載體;報道基因載體構建;
(3)基因突變,包括單點突變,多點突變,基因缺失等;
(4)SiRNA表達載體與miRNA表達載體構建。
2、載體構建和改造服務說明
(1)客戶提供載體構建及改造所需的實驗方案,目的基因產物及序列(如果目的基因不好制備),載體及相關背景資料。
(2)若客戶只提供組織、細胞等樣本,還需提供目的基因NCBI登錄號,本公司將額外收取RNA提取及逆轉錄費用。
(3)對于表達載體、報告基因載體以及病毒載體等的構建,您需要提供序列資料、希望克隆到的載體、酶切位點等資料;
3、實驗服務周期及收費標準
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4、實驗服務報告內容
(1)含目的片段的質粒、含該質粒的細菌各一份;
(2)引物序列、載體圖譜、測序結果各一份;
(3)載體構建技術服務所需試劑耗材、儀器設備、操作過程一份;
(4)對于基因片段克隆,由于是您提供的基因片段,我們只能保證酶切的正確。
5、載體構建服務承諾
如涉及PCR,在客戶保證提供的模板正確的前提下,本公司保證PCR擴增的基因或功能元件片段無移碼突變,堿基序列正確率在100%以上。