一、實驗目的:
比較Simgen血漿游離核酸純化試劑盒和傳統煮沸法提取核酸的效果.
二、實驗方法:
1.使用Simgen血漿游離核酸純化試劑盒提核酸(實驗步驟詳見說明書)
2. 使用傳統煮沸法提核酸
3. 將所得核酸分別進行擴增
三、實驗樣本:
將SRY基因(男性特征基因)擴增產物用人血漿稀釋到10 copies/ml后作為樣本。
四、實驗結果:
曲線1是Simgen血漿游離核酸純化試劑盒提取的核酸5 μl作為模板檢測SRY基因的效果。
曲線2是Simgen血漿游離核酸純化試劑盒提取的 核酸20 μl作為模板檢測SRY基因的效果。
曲線3是煮沸法提取的核酸5 μl作為模板檢測SRY基因的效果。
五、實驗結論:
1. 根據曲線1和2可知,加大DNA模板量,CT值變小,說明Simgen血漿游離核酸純化試劑盒提取的DNA純度較高,不含雜質和PCR抑制物。
2. 根據曲線1和3分析,針對核酸含量少的血漿樣本時,傳統煮沸法效果極差,很難提取到有效核酸,因此擴增結果顯示為陰性,而Simgen血漿游離核酸純化試劑盒卻能很好解決這一難題,提取到大量有效核酸。