使用天根血液穩(wěn)定劑(DP440-02),按血液:穩(wěn)定劑=1:3的比例進行稀釋,500μl稀釋后的樣本使用全血總RNA試劑盒能正常分相,但提取濃度較低。
如果能正常分相,可能RNA還是提取到了。由于血液已經(jīng)經(jīng)過了3倍的稀釋,RNA濃度低可能還是正常的。因為500 μl人血用我們的試劑盒提取到RNA的濃度在50~100ng/μl(50 μl洗脫)范圍內(nèi),那么從1/3體積的血液中提取到RNA的濃度可能會在16~33ng/μl的范圍。如果要提高RNA的回收量,比較簡單的方法就是平行多做幾管500 μl血樣(分別按比例加入1ml Buffer L9)提取,然后將離心獲得的上清混合乙醇后在一個純化柱中離心過柱,就可以富集RNA(洗滌步驟不用增加),達到提高RNA濃度的目的。